Были поставлены задачи по созданию работающей молекулярной системе.
-определить начинки биосенсора
-подобрать экспериментально параметры и условия, при которых система будет оптимально работать.
-протестировать молекулярную систему и описать ее функционирование.
В итоге, мы имеем следующие промежуточные успехи:
- Наработаны и выделены плазмиды, кодирующие следующие белки:
- фьюжн-белок dCas9 с N-концевым доменом бета-лактамазы
- фьюжн-белок dCas9 с С-концевым доменом бета-лактамазы - Подобрана экспрессионная система для наработки таргетных белков (компетентные клетки Rosetta gami 2, Dh5a; праймеры для переклонирования в экспрессионный вектор)
- Наработаны и выделены плазмиды, кодирующие различные варианты dCas: Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Streptococcus thermophilus, Campylobacter jejuni; а также с dCasX.
Поставлены следующие краткосрочные цели:
- Наработка и очистка целевых белков и проверка их функциональности
- Оценка реконституции сплит-системы и ее тестирование с последовательностями-мишенями (гель-шифт)
- Проверка молекулярной системы с контрольными образцами
- Андрей Буйневич
- Автор проекта
Комментарии